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货号 | TK01827 |
物种 | |
设计 | Solid phase sandwich ELISA technique. |
标准 | 8 standards, serially diluted from 1 prepared lyophilized standard. |
对照 | None provided. |
样品形式 | Serum etc. |
样品量 | 25 μL / determination. |
描述 | 2 hour incubation (RT) + 1 hour (RT) + 30 min. (RT) = 3 hours, 30 min. total incubation time. |
标准范围 | 0/2 - 200ng/mL |
灵敏度 | 100 pg/mL |
放射性 | |
别名 | |
保存条件 | 2 - 8°C |
注意 | 仅用于科学研究, 不能用于疾病诊断. |
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组蛋白A酶联免疫试剂盒浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗蛋白A酶联免疫试剂盒抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的蛋白A酶联免疫试剂盒会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗蛋白A酶联免疫试剂盒抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗蛋白A酶联免疫试剂盒抗体与结合在包被抗体上的蛋白A酶联免疫试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,蛋白A酶联免疫试剂盒浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中蛋白A酶联免疫试剂盒的浓度。
可检测样本中的蛋白A酶联免疫试剂盒,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据或曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
板内精密度: 低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测30次 板间精密度: 低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测30次
分别往5个不同样本中添加已知浓度的蛋白A酶联免疫试剂盒,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
样品形式 | 回收率范围 (%) | 平均回收率 (%) |
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血清 (n=5) | 92-104 | 98 |
EDTA 血浆 (n=5) | 89-102 | 96 |
heparin 血浆 (n=5) | 83-98 | 95 |
分别往5个样本中添加已知浓度的蛋白A酶联免疫试剂盒,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
血清 (n=5) | EDTA 血浆 (n=5) | heparin 血浆 (n=5) | ||
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1:2 | 范围 (%) | 92-105 | 87-99 | 88-108 |
均值 (%) | 94 | 94 | 93 | |
1:4 | 范围 (%) | 94-100 | 91-99 | 90-99 |
均值 (%) | 95 | 95 | 95 | |
1:8 | 范围 (%) | 92-107 | 90-102 | 91-108 |
均值 (%) | 93 | 93 | 94 | |
1:16 | 范围 (%) | 94-101 | 87-108 | 94-105 |
均值 (%) | 93 | 95 | 95 |
未拆封的蛋白A酶联免疫试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
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ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 4℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 4℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 4℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
1.酶标仪(450nm波长滤光片)
2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3.37℃恒温箱
4.双蒸水或去离子水
5.吸水纸
1. 准备好所有试剂、样品、标准品;
2. 加100ul样品或标准品进96孔板,37度孵育1小时;
3. 去掉上清,加入100ul是试剂 A,37度孵育1小时;
4. 去掉上清,并用去离子水清洗三次;
5. 去掉上清,加入100ul是试剂 B,37度孵育半小时;
6. 去掉上清,并用去离子水清洗五次;
7. 加入90μl底物. 37度孵育10-20分钟;
8. 加入50μl终止液,立即在450nm波长下读取数据。
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