Cytochrome c

细胞色素c检测试剂盒

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the determination of human Cytochrome c in cell culture lysates, whole blood, and serum. For research use only, not for use in diagnostic procedures.
价格: 3565.8元
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基本信息

操作手册 查看操作手册
货号 TK01225
物种 Human
设计 Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).
标准 7 calibrators, serially diluted from 1 prepared lyophlized calibrator.
对照 None provided.
样品形式 Cell culture lysates, whole blood, and serum.
样品量 100 μL of properly prepared/diluted unknown / determination.
描述 2 hour incubation (RT) + 1 hour (RT) + 10 min. (RT) = 3 hours, 10 min. total incubation time.
标准范围 0.08 - 5.00 ng/mL
灵敏度
放射性
别名
保存条件 2 - 8°C
注意 仅用于科学研究, 不能用于疾病诊断.

用途

该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组细胞色素c检测试剂盒浓度

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗细胞色素c检测试剂盒抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的细胞色素c检测试剂盒会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗细胞色素c检测试剂盒抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗细胞色素c检测试剂盒抗体与结合在包被抗体上的细胞色素c检测试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,细胞色素c检测试剂盒浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中细胞色素c检测试剂盒的浓度。

特异性

可检测样本中的细胞色素c检测试剂盒,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

典型数据

由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据或曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

精密度

板内精密度:
低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测30次
板间精密度:
低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测30次

回收率

分别往5个不同样本中添加已知浓度的细胞色素c检测试剂盒,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

样品形式 回收率范围 (%) 平均回收率 (%)
血清 (n=5) 89-107 98
EDTA 血浆 (n=5) 88-99 92
heparin 血浆 (n=5) 91-99 93

线性

分别往5个样本中添加已知浓度的细胞色素c检测试剂盒,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

    血清 (n=5) EDTA 血浆 (n=5) heparin 血浆 (n=5)
1:2 范围 (%) 93-105 87-105 91-104
均值 (%) 93 95 93
1:4 范围 (%) 90-103 88-99 88-105
均值 (%) 95 94 94
1:8 范围 (%) 88-106 88-105 87-108
均值 (%) 94 93 93
1:16 范围 (%) 92-100 93-99 94-103
均值 (%) 93 94 95

稳定性

未拆封的细胞色素c检测试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

中文名称 英文名称 规格 保存条件
ELISA酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 条 -20℃,可存放6个月
冻干标准品 Reference Standard 2 支
浓缩生物素化抗体(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
浓缩HRP酶结合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6个月
标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 4℃.可存放6个月
生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 4℃(避光)
反应终止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 4℃
封板覆膜 Plate Sealer 5 张
产品说明书 Product Description 1 份
质检报告 Certificate of Analysis 1 份

说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

实验所需自备物品

1.酶标仪(450nm波长滤光片)
2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3.37℃恒温箱
4.双蒸水或去离子水
5.吸水纸

操作步骤

1. 准备好所有试剂、样品、标准品;
2. 加100ul样品或标准品进96孔板,37度孵育1小时;
3. 去掉上清,加入100ul是试剂 A,37度孵育1小时;
4. 去掉上清,并用去离子水清洗三次;
5. 去掉上清,加入100ul是试剂 B,37度孵育半小时;
6. 去掉上清,并用去离子水清洗五次;
7. 加入90μl底物. 37度孵育10-20分钟;
8. 加入50μl终止液,立即在450nm波长下读取数据。

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